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固相萃取實驗操作如何取得平衡點

更新時間:2021-12-20       點擊次數(shù):2700
   固相萃取主要是通過固相吸附劑上的官能團與目標化合物的官能團之間的作用力來保留/吸附的,這種作用力可分為非極性作用力、極性作用力、離子作用力、共價作用力等。
  我們在用固相萃取時,面臨的一個問題就是:液體應該以什么速率過柱流出,我的經(jīng)驗是,要想效果好,就要慢,盡量慢。
  在固相萃取條件選擇上,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不必如此。尤其在用重力法時,由于效率高,很多情況下是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅液體流出速度會更慢,而且在洗脫時的擴散會很明顯。
  因此建議,夠用就行,在能保證效率時,填料盡量少,加液也不宜多。固相萃取從原理上是色譜分離,但是在操作時最好只把它作為吸附萃取劑使用,由于填料性質、松緊常有差異,因此在實際實驗中不必因為追求效果的最佳化而設計出很復雜的洗脫程序。
  在建立條件中,我們應該盡量多利用現(xiàn)成的資料,盡快地建立起體系,同時要對操作過于復雜的步驟保持警惕性,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點。
  對于固相萃取柱中的填料,我們如果局部放大地看,能夠看到其實它們是有很多的空隙,液體流通的渠道很多,如果流得快,相當比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,給它們一個充分作用的機會。
  非極性作用力:對于鍵合硅膠及聚合物吸附劑而言,非極性作用力產(chǎn)生于固相萃取材料官能團上的碳氫鍵與目標化合物的碳氫鍵之間,常常被用于從樣品基質中吸附分離具有非極性結構的目標化合物?! ?br />極性作用力:極性作用力發(fā)生在許多固相萃取材料極性表面與樣品中目標化合物的極性官能團之間,常見的具有極性作用力的吸附劑在色譜中一般都稱為正相色譜吸附劑。
  離子作用力:離子作用力發(fā)生在帶相反電荷的目標化合物與固相萃取吸附劑官能團之間。
  共價作用力:共價作用力發(fā)生在共價填料與目標化合物之間,共價鍵不易被打斷,但有的官能團形成的共價鍵在改變溶劑環(huán)境的條件下是可逆的,如苯硼酸基。
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